Kısıtlama enzimleri neden% 50 gliserol çözeltisinde tutulmaktadır?

Kısıtlama enzimleri neden% 50 gliserol çözeltisinde tutulmaktadır?
Anonim

Cevap:

Onları sağlam tutmak için …

Açıklama:

Kısıtlama Enzimler ÇOK küçük miktarlarda kullanılır, ancak genellikle biraz daha büyük gruplar halinde satın alınır.

Başka bir şey yapmazsanız, genellikle aynı grupla farklı testler yapmayı tercih edersiniz. Bu nedenle satın alınan partinin uzun süre saklanması gerekir.

Çoğu enzim 4 derece Santigrat'taki tamponlarında bir süredir tamamen mutludur, ancak sonunda bozulur. 24 saat genellikle kabul edilen sınırdır.

Uzun süreli depolama için parti dondurulmalıdır. -20C standarttır ve birkaç ay tutacaktır. Daha uzun süreler için (örneğin bir veya daha fazla yıl) -70C normdur.

Çok sık erimekten / tekrar donmadan kaçınmak için hızla ve küçük kaplarda (örn. Eppendorfs) dondurulması gerekir.

Bu düşük sıcaklıklarda proteine zarar gelmemesi için DTT (Di-Thio-Treitol), Serum Albumin ve en önemlisi Gliserol (% 5-50) gibi stabilizatörler eklenmeli / eklenmelidir.

Garip bir şekilde, -20 ° C'de% 50 Gliserol kullanmak gereklidir, oysa -70 Gliserol gerçekten gerekli değildir, buna rağmen ilavesi proteini stabilize etmeye yardımcı olabilir …