Cevap:
SDS-PAGE ile ayrılmış ve daha sonra bir zara aktarılmış proteinleri tespit etmek için antikorların kullanılmasıdır.
Açıklama:
Hücreler bir protein karışımı (binlerce) içerir ve bunlar SDS-PAGE ile ayrılabilir.
SDS-PAGE'den gelen proteinler daha sonra, bir elektrik alanın kullanılmasıyla, jelden bir zar içine tipik olarak nitroselüloz veya poliviniliden florür (PVDF) ile yapılan bir membrana transfer edilir.
Membran, ilgilenilen proteine özgü bir primer antikor ile problanır. Daha sonra birincil antikoru tespit etmek için ikincil bir antikor kullanılır. İkincil antikor, membran üzerinde görünür bir bant vermek için kimyasal bir reaksiyonla tespit edilebilen bir işaretleyici veya özel bir kamera tarafından yakalanabilen bir sinyal içerecektir.
Gerekirse, kariyerim boyunca birkaç yüz Western lekesi yaptığım için bu cevabı geniş ölçüde genişletebilirim.
Western blot HIV testi nedir?
Enzim bağlı immünosorbent deneyi (ELISA), ayrıca bir enzim immünoassay (EIA) olarak da bilinir. HIV testi için bir dizi kan taraması yapılır. Enzim bağışıklık tahlili (EIA) olarak da bilinen enzim bağlı immünosorbent tahlili (ELISA), sağlık uzmanınızın HIV taraması yapması gereken ilk testtir. ELISA, Western blot testi gibi, kanınızdaki HIV antikorlarını tespit eder.
Western blot immünolojik testi nedir?
Western blot (protein immünoblot), bir doku homojenatı veya ekstraktı numunesinde spesifik proteinleri tespit etmek için kullanılan yaygın olarak kullanılan bir analitik tekniktir. Bu görevi gerçekleştirmek için gereken temel unsurlar şunlardır: Protein karışımlarının jel elektroforezi kullanılarak boyutlarına göre ayrılması. Ayrılmış proteinlerin katı bir desteğe verimli aktarımı. Hedef proteinin yaklaşık olarak eşleşen antikorlar tarafından spesifik tespiti. Western blotların hem büyüklüğüne hem de bir antikorun bağlanmasına bağlı olarak spesifik bir proteinin varlığını a
Gruplar Western Blot'ta görünmüyorsa sorun ne olabilir?
Birçok ... Grupların batıdaki leke üzerinde görünmemesinin birçok nedeni var. Örnek ve antikor kombinasyonları geçmişte çalıştı mı? Aşağıda, şu anda bantların ortaya çıkmamasına neden olabilecek şu anda düşünebileceğim bir kısmı var: Protein jelden aktarıldı mı? Bantların var olup olmadığını görmek için zarı ponceau S veya amido siyahı gibi bir şeyle boyamaya çalışın. Bazen zardaki protein bantlarını ıslatıp ışığa açılı olarak tutarak görebilirsiniz. Birincil antikor çalışıyor mu? Bu, test edilmesi zor bir durumdur ve yapabileceğiniz tek y