Bilim adamları, araştırmak için DNA'yı nasıl izole eder?

Cevap:

Bunu yapmak için birkaç adım var, lütfen kötü İngilizcemi görmezden gel, umarım süreci hala anlayabilirsin.

Açıklama:

Bu düşündüğünüz kadar zor değil.

Diyelim ki, DNA'yı bir buzağı timusundan izole etmek istiyoruz, bu talimatları izlemelisiniz (bildiğim kadarıyla aynı elmadırlar, ancak küçük farklılıklar vardır):

1. 3 parça 3 gram alın ve mümkün olduğunca küçük, küçük parçalara kesin.

2. Parça başına 75 mL Saline-sodyum sitrat (SSC) içeren bir karıştırıcıya koyun ve karıştırıcının bıçağının tamamen SSC ile kaplandığından emin olun, bu nedenle gerekirse bir parça timus ekleyin.

   SSC, hücre zarlarının çözündüğünden emin olur.

   Her şey düzgün olana kadar karıştırmaya devam et.

3. Santrifüj için bir tüpe koyun ve santrifüjün kırılmaması için başka bir tüple daralayın

4. Tüpü 20 dakika 5000 rpm'de santrifüje yerleştirin.

5. Tüpleri santrifüjden çıkardığınızda iki bileşen bulunduğunu görmelisiniz. Alt katı bir maddeye sahiptir, buna pelet denir ve bu hücre çekirdeğini DNA ile tutar. Ayrıca süpernatan denilen ve çözünmüş hücre zarları ile SSC'den oluşan sıvı bir madde göreceksiniz.

6. Süpernatantı bir sıvı hareketinde dökün, buna boşaltma denir ve bu sizi pelet ile bırakır.

7. Pelet tüpün içerisine küçük miktarda 2.2 M NaCl koyun, böylece pelet sadece NaCl ile kaplanır. NaCl, DNA'yı çevreleyen proteinlerin çökelmesine neden olur.

8. Boş bir test tüpü veya karıştırma çubuğu ile karıştırın. Sonunda iki bileşen almalısın. Alttaki proteinler ve üstündeki yapışkan bir sıvı.

9. Viskoz sıvısını bir pipetle çıkarın ve viskoz sıvıyla herhangi bir protein almadığınızdan emin olun. (çok küçük protein parçalarından kaçınmak çok zordur, ancak mümkün olduğu kadar çok proteinden uzak durmaya çalışın)

10. Bir belaya pipetlediğiniz viskoz sıvıyı koyun ve 2 kat daha fazla etanol ekleyin. Ama etanolü yavaşça ekleyin çünkü DNA ile karıştırmak istemezsiniz. Etanol ve viskoz akışkan arasındaki arayüzde, DNA kabarcıklarının ortaya çıktığını görmelisiniz.

11. Bir cam çubukla hafifçe karıştırın, DNA negatif olarak yüklenir, böylece çubuğa yapışması gerekir.

12. Test tüpüne koyun ve SSC ile çözün.

Özel bir makine daha sonra size ne kadar DNA'dan izole olduğunuzu ve ne kadar saf olduğunu söyleyebilir.